細胞(bao)計數是細胞(bao)培(pei)養(yang)過程(cheng)中的重(zhong)要步驟,為了解細胞(bao)的濃(nong)度、數量和活率等信息,實驗人員常用臺盼(pan)藍染(ran)料或(huo)AOPI熒光(guang)染(ran)料對細胞(bao)進行染(ran)色-計數。
1、臺盼藍染(ran)色(se)法
臺盼藍染(ran)色(se)是細(xi)胞(bao)(bao)計數中常用的活/死(si)細(xi)胞(bao)(bao)鑒定染(ran)色(se)方法之一。
原理:正(zheng)常的活細胞,胞膜結構完整(zheng),能(neng)夠排斥臺盼(pan)藍,細胞不(bu)被染色;而死細胞的胞膜不(bu)完整(zheng),通透性增加,既死細胞會被染成藍色,利用臺盼藍染料的特性便可區分活/死細胞。
缺點:
1-臺(tai)盼藍對細(xi)胞有(you)毒害作用,會(hui)致死有(you)損傷的細(xi)胞,導致細(xi)胞活性檢(jian)測結果有(you)所偏差;
2-細胞(bao)碎片(pian)多(duo)、雜質多(duo)等(deng)情況(kuang)下,無法進行準(zhun)確計數。
適(shi)用細胞種(zhong)類:培養系細胞。
2、AOPI染色(se)法
當細胞樣(yang)品(pin)中的雜質過多,明場下無法進行準(zhun)確計數時,我們可以在熒光通道下,用AOPI熒光染料對細胞進行染色。
原理:AOPI熒光染料因其只與DNA和RNA結合的特性——既活細(xi)胞呈現綠色(se),死細(xi)胞呈現紅色(se),利用AOPI染色法,可排除雜質對目標細胞的干擾,快速區分活/死細胞。
優(you)點(dian):可排除紅細胞、血(xue)小板(ban)、細胞碎片等(deng)雜質對目標細胞的干擾(rao)。
缺點(dian):與臺盼藍試(shi)劑相比,成本(ben)較高。
適用細胞(bao)種類:免疫細(xi)胞、原代細(xi)胞、血液(ye)細(xi)胞等。
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